
生物透射電鏡TEM
樣品要求
1.樣本要求:僅接收2.5%戊二醛固定液固定后的生物樣品
(1)細胞樣品:用1.5ml的尖底管,離心成團(至少黃豆大小),加入固定液(固定液加滿離心管,使樣品完全浸沒在固定液中),放置于4°C固定12h后,用泡沫盒加冰袋低溫保存運輸。 (細菌樣品要求同細胞)
(2)組織樣本:腸、血管、皮膚、肌肉等有方向性樣本需切成1mm*3mm*0.5mm長方體小塊(如下圖B),要觀察的面為橫切面(1mm*0.5mm),使用2mL離心管加滿2.5%戊二醛固定液;無方向性的組織,如肝臟、腎臟、肺臟等可切成1mm3立方體小塊(如下圖A),使用2mL離心管加滿2.5%戊二醛固定液,放置于4°C固定12h后,用泡沫盒加冰袋低溫保存運輸。注意:樣本管與冰袋隔開,避免固定液結(jié)冰。固定液滲透能力有限,超出此范圍后組織會無法完全固定,后續(xù)實驗無法完成,請務(wù)必重視此過程。
特別注意:取材時盡量精確到需要觀察的目的部位(如觀察腎小球取腎皮質(zhì);觀察胰島取胰島豐富的胰尾;皮膚,腸胃等在固定液中易打卷的組織可將組織粘在濾紙上進行固定)。
需求模板
常見問題
透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope,簡稱TEM),可以看到在光學顯微鏡下無法看清的小于0.2um的細微結(jié)構(gòu),這些結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)或超微結(jié)構(gòu)。要想看清這些結(jié)構(gòu),就必須選擇波長更短的光源,以提高顯微鏡的分辨率。1932年Ruska發(fā)明了以電子束為光源的透射電子顯微鏡,電子束的波長要比可見光和紫外光短得多,并且電子束的波長與發(fā)射電子束的電壓平方根成反比,也就是說電壓越高波長越短。目前TEM的分辨力可達0.2nm。